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病毒定量檢測
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細胞收獲液病毒定量檢測

作者:admin      發布時間:2018-04-09 11:46:50      閱讀次數:1421

珈創生物的新技術、新產品研發依托本公司的前沿技術研究院。研究院己形成由博士、碩士,學士組成的研發團隊,承擔前沿技術的研究。現已研究成功多項新技術,申請和授權發明專利16項,其中細胞收獲液病毒顆粒定量檢測技術;重組大腸桿菌外源因子污染檢測技術己廣泛應用。


病毒定量檢測技術

病毒定量檢測技術主要用于培養細胞發酵液或收獲液上清中病毒污染的檢測,是一項負染色電鏡定量實驗技術(Quantitation of Viral Contaminants by Negative Stain Electron Microscopy)。其原理是運用電鏡直接觀察待檢測樣品中是否含有病毒污染物,同時通過計數已知濃度的標準參照物(乳膠顆粒)和病毒顆粒,對病毒污染物進行定量的技術。本病毒定量檢測技術的優勢在于,應用直接超速離心將已知濃度的乳膠顆粒標準品與送檢樣品沉積到銅網格上,再對樣品進行負染色后進行電鏡觀察,大大提高了病毒樣品檢測的靈敏度和特異性,是一種快速化、可視化的檢測手段。該測試的檢測限為約1×106個顆粒/ml,一些情況下可能以低于檢測限的濃度檢測病毒顆粒。如果必須使用測試樣品的稀釋度來評價樣品,則必須調整檢測限度。例如20倍試驗樣品的稀釋將使檢測限變為20倍至2×107個顆粒/ml。如果TEM結果為陰性,則應假定病毒的滴度不超過檢測限。

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 A:標準乳膠球(陰性對照);B:水泡性口炎病毒VSV樣品(陽性對照1)

 C:口蹄疫病毒FMDV樣品(陽性對照2);D:逆轉錄病毒樣品


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